我们讨论了三种常见的质粒在电泳中。超螺旋结构和酶切割后的线性结构基本确定，但质粒在第三条带（质粒反复冻融后大量出现）中的结构一直存在争议。现在假设它的结构是质粒二聚体，那么这三种结构都是质粒。它们的转化效率相同吗？好奇的小编先在百度上搜索了一下。有人说线性质粒的转化效率是超螺旋环状质粒的1/100。他认为领导说要通过实验得出结论。为了验证实验，小编设计了以下实验。

实验准备：

质粒样本：新鲜提取的质粒样本：pUC-19以及-20℃储存在冰箱中并多次使用pUC-19(主条带为质粒二聚体)。

实验材料：DH5α感受态细胞（SimgenCat.No.8301010）.凝胶DNA回收试剂盒（SimgenCat.No.2001050）.Amp+抗性平板.1.5ml离心管.EcoRI内切酶。

实验设备：台式小离心机.电泳仪.恒温培养箱.微量紫外分光光度计.移液器等。

实验内容：

1.使用凝胶DNA回收试剂盒分别回收酶切割产物和质粒二聚体，用微量紫外分光光度计测量其浓度。新鲜提取的质粒用无菌超纯水分别提取.酶切产物.二聚体稀释至0.1ng/μl和1ng/μl；

2.将-80℃存放的DH5α感觉态细胞在冰箱上融化，根据感觉态细胞说明书转化三种不同构型的颗粒，如下表所示，

3.将转化后的感觉态细胞涂抹在Amp+平板上，37℃培养恒温箱过夜，观察转化结果。

图片从左到右分为线性粒子.质粒二聚体.超螺旋颗粒，从上到下为1ng.0.1ng，从上图结果来看，超螺旋质粒无疑是转化率最高的，线性质粒的转化率最低，约为超螺旋质粒的1/20，质粒二聚体的转化率为0.1ng与超螺旋质粒的对比不是很明显，在1ng时转化率约为超螺旋质粒的1/3。

感觉态细胞的原理没有明确的说法。接受度最高的是通过处理增加细胞的渗透性，使细胞膜表面出现一些孔，方便外源性基因或载体进入感觉态细胞。

如果这个理论是正确的，那么这些孔自然有一定的尺寸，所以进入细胞的效率可能是不同的主要原因：我们比较这三种不同形状的粒子DNA，超螺旋结构颗粒整体尺寸最小，最容易进入细胞；线性颗粒结构不如超螺旋紧凑，可能卡在细胞膜外，不能进入细胞，属于残留颗粒，自然效率最低；至于二聚体质颗粒DNA，虽然体积大，进入细胞的效率降低，但质粒结构仍然完整，因此转化效率介于线性质粒和超螺旋质粒之间。

至少，我们的实验证明，线性粒子仍然可以进行转化实验，但我们不知道线性粒子成功转化的真正原因。也许线性粒子通过细胞内酶的修饰（如重新连接）产生完整的粒子。