质粒(plasmid)从细菌、放线菌、丝状真菌、大型真菌、酵母到植物、大型真菌、酵母到植物,甚至人体。从分子组成的角度来看,有DNA质粒,也有RNA质粒;从分子结构的角度看,有线质粒和环状质粒:其表型也多种多样。细菌质粒是基因工程中最常用的载体。
通常,科学家利用质粒在靶细胞中表达基因。质粒的灵活性、兼容性、安全性和经济性促进了分子生物学家在各种用途中的应用。
一些常用的质粒类型包括:克隆质粒、表达质粒、基因下调质粒、基因敲除质粒、报告质粒、病毒质粒等。克隆质粒:旨在扩大DNA片段表达质粒:利用乳糖操纵子等结构过表达目的基因基因下调质粒。
利用基因沉默(抑制)mRNA翻译)原理减少了宿主细胞内源基因的表达基因。
基因敲除所需的元件可以插入质粒中,如使用基因敲除所需的元件CRISPR/Cas敲除时,质粒中含有Cas9蛋白的基因序列并插入一段设计以转录gRNA的序列。
当同源重组法被拆除时,上下游同源序列报告质粒插入目的基因:整合具有报告基因的重组质粒。报告基因是一种可以检测到的蛋白质或酶的基因,也就是说,它是一种表达产物的基因,很容易被识别。
将其编码序列与基因表达调节序列相结合,形成嵌合基因,或与其他目的基因相结合,在调节序列的控制下表达,从而利用其表达产物标定目的基因的表达调节来筛选转化体。
病毒颗粒:改造病毒的基因组,去除其致病性和传染性,保留其他功能,有利于目标基因灵活进入细胞并融入基因组。到目前为止,quan世界科学家在各种实验中广泛应用于各种技术,包括荧光成像、重组DNA技术、蛋白质大规模生产、疾病模拟、药物开发和基因编辑,使质粒几乎存在于当前生命科学实验室。